如何規(guī)劃PCR實驗室設(shè)計
作者： 實驗室設(shè)計發(fā)表時間：2018-09-29 11:15:31瀏覽量：5929【小中大】
如何建立標(biāo)準(zhǔn)PCR實驗室？ PCR實驗室如何設(shè)計成專業(yè)的？ PCR實驗室管理的關(guān)注點是什么？
標(biāo)準(zhǔn)PCR實驗室分為四個區(qū)域，即：
N1。試劑準(zhǔn)備區(qū)；
N2。樣品加工區(qū)；
N3。核酸擴(kuò)增區(qū)；
N4。...
文本標(biāo)簽：PCR 實驗室,實驗室規(guī)劃，實驗室設(shè)計要求,實驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)
如何建立標(biāo)準(zhǔn)PCR實驗室？ PCR實驗室如何設(shè)計成專業(yè)的？ PCR實驗室管理的關(guān)注點是什么？
標(biāo)準(zhǔn)PCR實驗室分為四個區(qū)域，即：
N1。試劑準(zhǔn)備區(qū)；
N2。樣品加工區(qū)；
N3。核酸擴(kuò)增區(qū)；
N4。產(chǎn)品分析區(qū)；
如果使用全自動分析儀，則可以適當(dāng)?shù)亟M合區(qū)域。 （進(jìn)入每個工作區(qū)域必須嚴(yán)格按一個方向，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服，如不同的顏色。工人離開工作區(qū)時不應(yīng)帶出工作服）
PCR實驗室布局
[各地區(qū)的職能分別為]
試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴(kuò)增試劑的制備、包裝和貯存
樣品處理區(qū)：樣品注冊、子包；核酸提取、保存和加載
擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：擴(kuò)增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、注冊和報告
預(yù)擴(kuò)增區(qū)和后擴(kuò)增區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開，并且必須使用不同的房間。最好在兩個區(qū)域之間有一定的間隔。
使用商業(yè)試劑盒在樣品處理區(qū)域中制備小試劑
樣品處理區(qū)域和試劑制備區(qū)域可以位于同一房間，只要滿足以下操作和清潔要求：
在生物安全柜中操作；
每個實驗者、實驗組使用各自的試劑和消耗品；
將含有污染物的容器密封并使用一次；
實驗前后對操作區(qū)域和共用設(shè)備進(jìn)行有效清潔和消毒。
PCR實驗室建設(shè)規(guī)劃要點
1、主要結(jié)構(gòu)：
主體是彩鋼板、鋁合金型材。房間的所有內(nèi)角、正角均由鋁合金50圓形鋁制成，這解決了容易污染的問題、灰塵、難以清潔等問題。結(jié)構(gòu)牢固，線條簡潔，外形美觀，密封性好。
2、標(biāo)準(zhǔn)三區(qū)分離和氣壓調(diào)節(jié)：
PCR過程分為試劑制劑。在三個獨立的實驗區(qū)中進(jìn)行、樣品制備和PCR擴(kuò)增測定。整個地區(qū)都有一個整體緩沖走廊。每個獨立的實驗區(qū)都設(shè)有一個緩沖區(qū)，每個區(qū)域都受氣壓調(diào)節(jié)，從而在整個PCR實驗過程中保護(hù)試劑和標(biāo)本免受氣溶膠污染，減少了對人和環(huán)境的擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。
緩沖器I可以打開，緩沖器II的排氣扇和PCR放大區(qū)域在外面排出，可調(diào)節(jié)風(fēng)量的出風(fēng)口安裝在實驗區(qū)和每扇門的外壁上，空氣通風(fēng)在室內(nèi)通過回風(fēng)口。 。3、消毒：
紫外燈安裝在三個實驗區(qū)域和三個緩沖區(qū)的頂部，并在傳輸窗口內(nèi)進(jìn)行消毒。
在試劑制備區(qū)域和樣品制備區(qū)域中還提供移動的紫外燈，以對實驗臺進(jìn)行部分消毒。
4、機(jī)械鏈不銹鋼傳遞窗：
試劑和樣品通過機(jī)械互鎖不銹鋼（不建議用于電子聯(lián)鎖）進(jìn)行交付，以確保試劑和樣品在轉(zhuǎn)移過程中不被污染（個人分流）
5、地
建議使用PVC盤繞地板或自流動地板以獲得良好的地面。易于清潔和耐腐蝕。水磨石地板也可以無條件地使用，或者大塊瓷磚（至少800 mm x 800 mm）接縫需要小于2 mm。
6、照明
燈具應(yīng)清潔光滑，可達(dá)到易于清潔的特點、無塵。
注意施工過程
●標(biāo)準(zhǔn)化的安裝流程和全面的服務(wù)流程
●嚴(yán)格遵循科學(xué)設(shè)計的安裝流程。
●安裝前，需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源線位置，電話網(wǎng)線入口位置，進(jìn)水壓力，最小安裝空間，地面，通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管位置等。理想的空間大小和通風(fēng)口的大小。
設(shè)計要點
PCR實驗室可以是分散形式或組合形式。完成一組PCR實驗，通常通過試劑制備、樣品處理、核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析四個實驗步驟，如果實驗過程需要，還應(yīng)增加樣品破碎過程。
一個、分散形成PCR實驗室
所謂的分布式PCR實驗室是指完成上述實驗過程的實驗室彼此相距很遠(yuǎn)并且處于分布式排列。對于這種類型的PCR實驗室，不需要特殊條件，因為實驗不容易相互干擾。
兩個、組合形成PCR實驗室
所謂組合形式PCR實驗室是指完成PCR的四個實驗過程的實驗室彼此相鄰排列以形成獨立實驗區(qū)域的形式。對于組合式PCR實驗室，由于每個實驗的集中安排，容易引起相互干擾，因此對整體布局和屏障系統(tǒng)有一定的要求。每個艙室在入口處設(shè)有緩沖室，以減少室內(nèi)和室外空氣交換。
一些經(jīng)驗：
試劑制備室和樣品處理室應(yīng)略微正壓，以防止含有核酸氣溶膠的外界空氣進(jìn)入，造成污染；
通過將進(jìn)氣量控制為大于排氣量可以實現(xiàn)正壓效果。
核酸擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室應(yīng)處于輕微的負(fù)壓下，以防止含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出污染試劑和樣品，通過控制排氣量可以實現(xiàn)負(fù)壓效應(yīng)大于進(jìn)氣量。在理想情況下，可以在PCR實驗室的緩沖室中設(shè)定正壓，使得室內(nèi)空氣不會流到室外，室外空氣不會流到室內(nèi)。
PCR實驗室的進(jìn)氣口由原來的中央空調(diào)控制。需要將中央空調(diào)風(fēng)口安裝到指定的固定點，地面攤鋪后高度為2600mm。
如果使用熒光PCR機(jī)，則可以組合擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室。
如果允許房間深度，可以設(shè)置PCR內(nèi)部專用走廊。應(yīng)該注意的是，在減少室內(nèi)和室外空氣交換時，緩沖室比專用走廊更有意義。
各個地區(qū)之間應(yīng)該有單向的實驗過程。、后勤、人流和氣流形成單向過程的保護(hù)屏障，避免實驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠污染實驗過程的錯誤后果。
實驗室的墻壁，包括天花板，在結(jié)構(gòu)上應(yīng)該是密不透的、；各個角應(yīng)采用圓弧線過渡；墻內(nèi)的墻壁干凈輕便、不吸收、耐腐蝕、易于清潔和消毒；地板材料應(yīng)滿足無間隙、無泄漏、光滑和清潔、耐腐蝕性要求。
PCR實驗室主要設(shè)備
試劑準(zhǔn)備區(qū)
儀器設(shè)備主要有冰箱、超凈站、采樣器、調(diào)音臺、天平和離心機(jī)等，采樣器除了特殊的、天平外，還應(yīng)有定時校準(zhǔn)
試劑應(yīng)放在干凈的工作臺中?；旌衔飸?yīng)該在分子生物學(xué)課上。制備試劑后，應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量檢測：是否有污染。、是檢測試劑的擴(kuò)增效應(yīng)。
標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)
儀器設(shè)備主要有生物安全柜、采樣器、離心機(jī)、培養(yǎng)箱、攪拌機(jī)等。
擴(kuò)增區(qū)
擴(kuò)增區(qū)的主要儀器是核酸擴(kuò)增儀、超潔凈表、微量取樣器、離心機(jī)、可移動紫外燈。儀器需要校準(zhǔn)。它配備了UPS電源，以防止停電對電壓波動引起的放大效應(yīng)的影響。
分析區(qū)域
該區(qū)域使用的設(shè)備有一個酶標(biāo)儀、洗衣機(jī)洗衣機(jī)、采樣器和水浴等。潔凈實驗區(qū)緩沖室的面積不能超過主實驗室的八分之一，這是受監(jiān)管的。
一些瑣碎的、不可忽視的設(shè)計
1.實驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計和壓力控制PCR實驗室沒有嚴(yán)格的純化要求，但為了避免各個實驗區(qū)域之間存在交叉污染的可能性，建議使用全流量全流量氣流組織。同時，要嚴(yán)格控制排氣的比例為、，以保證每個實驗區(qū)的壓力要求。
2.預(yù)防和控制污染
PCR實驗室設(shè)計的核心問題是如何避免污染。在實踐中，以下類型的污染是常見的：擴(kuò)增產(chǎn)物的污染；天然基因組DNA的污染；試劑污染和試樣之間的污染。由于污染發(fā)生，必須停止實驗直到找到污染源，并且必須丟棄實驗結(jié)果并且需要重復(fù)實驗。因此，在污染發(fā)生后，在實驗室周圍浪費(fèi)尋找污染源不僅浪費(fèi)時間和麻煩，而且浪費(fèi)人力和資源。因此，為避免污染，應(yīng)首先進(jìn)行預(yù)防，而不是排除。
PCR實驗室必不可少的嚴(yán)格管理
?。?）嚴(yán)格控制進(jìn)出實驗室的人員。與實驗無關(guān)的人員不得隨意進(jìn)入或離開實驗室，必要時設(shè)置進(jìn)出整個實驗區(qū)的獨立通道和門；
?。?）盡量減少實驗區(qū)域內(nèi)不必要的移動，以減少交叉污染的可能性
（3）擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是擴(kuò)增產(chǎn)物污染的最重要來源。廢液不能傾倒在實驗室中。必須將其浸入消毒劑溶液中并丟棄在遠(yuǎn)離實驗室的地方。使用過的尖端是一次性的。材料也應(yīng)在消毒液中浸泡和消毒處理，如焚燒；
?。?）擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能存在一些基因突變和有毒物質(zhì)，應(yīng)特別注意實驗人員的安全防護(hù)。
3.5完整的實驗室配套設(shè)施完整的實驗室配套設(shè)施是確保實驗工作的必要條件。設(shè)備和儀器應(yīng)根據(jù)每個實驗室的實驗內(nèi)容配備，如超潔凈工作臺、離心機(jī)、取樣器等。
粵公網(wǎng)安備 44030902001052號